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2022-04-01

Cube Biotech INDIGO - 新一代His标签纯化产品线


His-tag 标签的蛋白纯化是迄今为止在生物学和生物化学中常用的技术之一。然而,这种技术并非没有其局限性,常见的his-tag标签纯化技术,如Ni-NTA,与蛋白酶抑制剂或还原剂等缓冲液中常用的物质不相容。我们研发的INDIGO配基取代了传统的NTA或IDA配基。


 

INDIGO产品的优势


Figure 1: His-tag protein purification using INDIGO-Ni agarose beads 


INDIGO是什么?

INDIGO是一种新开发的配基,可将二价金属离子与琼脂糖微球结合,类似于NTA或IDA。


然而,INDIGO相对能比NTA和IDA更牢固地结合金属离子,从而带来了多种优势和好处,同时维持与NTA或IDA产品相同的纯化流程和方案。

DTT/还原剂稳定性

Figure 2: INDIGO beads are immune to the side-effects of reducing agents like DTT


在蛋白纯化过程中,保护蛋白的结构是非常重要的。这包括结构元素,如:二硫键。在蛋白质纯化过程中,可以将DTT等还原试剂添加到纯化缓冲液中,以保护这些结构。然而,Ni-NTA或Ni-IDA不允许这种情况,因为这样会使金属离子也因此而减少。


INDIGO却不同,因为INDIGO至少有20mM的还原剂耐受性。


蛋白酶抑制剂稳定性
为了提高蛋白纯化的产率,可以向纯化缓冲液中添加蛋白酶抑制剂。这些通常是螯合剂,如:EDTA。然而,它们也会剥离Ni-NTA和Ni-IDA琼脂糖微球的金属离子,因此不能正常用于His标签纯化。


INDIGO可以解决这样的情况,因为它具有至少20mM的螯合剂耐受性,从而消除了这个限制

Cube Biotech的INDIGO产品
INDIGO产品线涵盖几种蛋白质纯化方式的产品: