PureCube 100 Co-NTA Cartridge
组氨酸标签是广泛的蛋白纯化标签,其优点包括标签尺寸小、低免疫原性、在蛋白自然和变形状态下都保持有效性以及在去污剂以及多种添加剂成分环境下依然保持有效等多方面。Cube Biotech现新推出了新型PureCube 100 Ni-NTA Agarose系列产品,这款新型的填料是以高交联度且平均直径为100 µm的琼脂糖为基材,可用于更高流速要求的重力柱纯化和FPLC方面应用。
(1)100 µm 琼脂糖微球提供高流速;
(2)高达80 mg/ml结合率;
(3)高流速下仍保持高纯度蛋白纯化能力;
(4)即使在低目标蛋白浓度环境下保持高回收率;
(5)高化学稳定性(在10 mM DTT 和1 mM EDTA环境下保持稳定)
和Ni-NTA相比较,Co-NTA具有更高的特异性,同时其亲和能力相对较弱(图3)。因此如对蛋白具有更高纯度要求的用户,可以选购PureCube 100 Co-NTA Agarose系列产品。同时,针对期望在细胞培养上清液里提取组氨酸标签蛋白或pull-down实验的用户,我们推荐使用PureCube Co-NTA MagBeads系列磁珠产品。
图3:IMAC中常用金属离子的亲和力和特异性比较
基于PureCube 100 Ni-NTA Agarose系列产品的高流速优势以及高NTA配基密度等特性,可以使高速动态纯化蛋白可以更好的实现。即使当流速达到7 ml/min时,纯化体系也能达到20 mg/ml的组氨酸标签蛋白纯化量。如果是分批次的纯化,则蛋白纯化量能达到80 mg/ml(见图1)。PureCube 100 Ni-NTA Agarose具有非常高的组氨酸标签蛋白亲和度,即使在非常低的蛋白密度情况下,其蛋白回收率也能高达85-100%(见图2)。
图1:PureCube 100 Ni-NTA Agarose 高动态结合能力。GFP通过1毫升PureCube 100 Ni-NTA Agarose一毫升预装柱在1-7 ml/min流速和重力柱进行纯化。
图2:PureCube 100 Ni-NTA Agarose具有卓越的蛋白回收率,图示中GFP通过一毫升预装柱纯化不同蛋白含量样品再后通过488 nm吸收光谱进行验证。
Cube Biotech提供的PureCube 100 Ni-NTA Agarose是以50%悬浮液状态。为了方便通过Western Blot实验验证组氨酸标签蛋白,Cube Biotech也提供高特异性组氨酸抗体—PentaHis antibody.
货号 | 产品 | 粒径 (μm) | 每柱 载量 | 运输 温度 | 储存 温度 | 应用 |
74602 | PureCube 100 Compact Cartridge Co-NTA (1x1ml) | 100 | 80mg/mL | 室温 | 4° C | 预 装 的 PureCube 100 Co NTA Agarose 填料,pH 稳定工作范围为2—13,在 10mM DTT环境保持稳定 |
74604 | PureCube 100 Compact Cartridge Co-NTA (5x1ml) | 100 | 80mg/mL | 室温 | 4° C | |
74606 | PureCube 100 Compact Cartridge Co-NTA (1x5ml) | 100 | 80mg/mL | 室温 | 4° C | |
74608 | PureCube 100 Compact Cartridge Co-NTA (5x5ml) | 100 | 80mg/mL | 室温 | 4° C |
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